AstrattoL'esperimento è stato condotto per studiare gli effetti della diluidina sulle prestazioni di deposizione e sulla qualità delle uova nelle galline e per avvicinarsi al meccanismo degli effetti determinando gli indici dei parametri delle uova e del siero. 1024 galline ROM sono state divise in quattro gruppi, ciascuno dei quali comprendeva quattro repliche di 64 galline ciascuna. I gruppi di trattamento hanno ricevuto la stessa dieta basale integrata rispettivamente con 0, 100, 150, 200 mg/kg di diluidina per 80 giorni. I risultati sono stati i seguenti. L'aggiunta di diluidina alla dieta ha migliorato le prestazioni di deposizione delle galline, di cui il trattamento a 150 mg/kg è stato il migliore; il suo tasso di deposizione è aumentato dell'11,8% (p < 0,01), la conversione della massa delle uova è diminuita del 10,36% (p < 0,01). Il peso delle uova è aumentato con l'aumento della diluidina aggiunta. La diluidina ha ridotto significativamente la concentrazione sierica di acido urico (p < 0,01); l'aggiunta di diluidina ha ridotto significativamente il Ca sierico2+e contenuto di fosfato inorganico e aumento dell'attività dell'alchina fosfatasi (ALP) del siero (p < 0,05), quindi ha avuto effetti significativi sulla riduzione della rottura delle uova (p < 0,05) e delle anomalie (p < 0,05); la diluidina ha aumentato significativamente l'altezza dell'albume. Valore di Haugh (p < 0,01), spessore del guscio e peso del guscio (p < 0,05), 150 e 200 mg/kg di diluidina hanno anche diminuito il colesterolo totale nel tuorlo d'uovo (p < 0,05), ma hanno aumentato il peso del tuorlo d'uovo (p < 0,05). Inoltre, la diluidina potrebbe aumentare l'attività della lipasi (p < 0,01) e diminuire il contenuto di trigliceridi (TG3) (p < 0,01) e colesterolo (CHL) (p < 0,01) nel siero, ha ridotto la percentuale di grasso addominale (p < 0,01) e il contenuto di grasso epatico (p < 0,01), ha avuto la capacità di prevenire la steatosi epatica nelle galline. La diluidina ha aumentato significativamente l'attività della SOD nel siero (p < 0,01) quando è stata aggiunta alla dieta per più di 30 giorni. Tuttavia, non è stata trovata alcuna differenza significativa nelle attività di GPT e GOT del siero tra il gruppo di controllo e il gruppo trattato. Si è dedotto che la diluidina potrebbe prevenire l'ossidazione della membrana cellulare.
Parole chiaveDiluidina; gallina; SOD; colesterolo; trigliceridi, lipasi
La diluidina è il nuovo additivo vitaminico antiossidante non nutritivo e ha gli effetti[1-3]di inibire l'ossidazione della membrana biologica e stabilizzare il tessuto delle cellule biologiche, ecc. Negli anni '70, l'esperto agricolo della Lettonia nell'ex Unione Sovietica scoprì che la diluidina aveva gli effetti[4]di promuovere la crescita del pollame e di resistere al congelamento e all'invecchiamento di alcune piante. È stato riportato che la diluidina non solo può promuovere la crescita degli animali, ma anche migliorare in modo evidente le prestazioni riproduttive degli animali e migliorare il tasso di gravidanza, la produzione di latte, la produzione di uova e il tasso di schiusa degli animali femmina.[1, 2, 5-7]Lo studio della diluidina in Cina è iniziato negli anni '80 e la maggior parte degli studi sulla diluidina in Cina si sono finora limitati all'uso dell'effetto e sono stati riportati pochi studi sulle galline ovaiole. Chen Jufang (1993) ha riferito che la diluidina potrebbe migliorare la produzione di uova e il peso delle uova del pollame, ma non ha approfondito[5]lo studio del meccanismo d'azione. Pertanto, abbiamo implementato uno studio sistematico dell'effetto e del meccanismo d'azione somministrando alle galline ovaiole una dieta addizionata con diluidina, e una parte dei risultati viene ora riportata come segue:
Tabella 1 Composizione e componenti nutrizionali della dieta sperimentale
%
----------------------------------------------------------------------------------------------
Composizione della dieta Componenti nutritivi
----------------------------------------------------------------------------------------------
Mais 62 ME③ 11,97
Polpa di fagioli 20 CP 17,8
Farina di pesce 3 Ca 3,42
Farina di colza 5 P 0,75
Farina di ossa 2 M et 0,43
Farina di pietra 7,5 M e Cys 0,75
Metionina 0,1
Sale 0,3
Multivitaminico① 10
Oligoelementi② 0,1
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① Multivitaminico: 11 mg di riboflavina, 26 mg di acido folico, 44 mg di orizanina, 66 mg di niacina, 0,22 mg di biotina, 66 mg di B6, 17,6 µg di B12, 880 mg di colina, 30 mg di VK, 66 UI di VE, 6600 unità di terapia intensiva di VDe 20000 unità di terapia intensiva di VA, vengono aggiunti a ogni chilogrammo di dieta; e 10 g di multivitaminico vengono aggiunti a ogni 50 kg di dieta.
② Oligoelementi (mg/kg): a ogni chilogrammo di mangime vengono aggiunti 60 mg di Mn, 60 mg di Zn, 80 mg di Fe, 10 mg di Cu, 0,35 mg di I e 0,3 mg di Se.
③ L'unità di misura dell'energia metabolizzabile è MJ/kg.
1. Materiali e metodo
1.1 Materiale di prova
La Beijing Sunpu Biochem. & Tech. Co., Ltd. dovrà fornire la diluidina; e l'animale da esperimento dovrà essere costituito da galline ovaiole commerciali romane di 300 giorni di età.
Dieta sperimentale: la dieta sperimentale deve essere preparata in base alle condizioni effettive di produzione, secondo gli standard NRC, come indicato nella Tabella 1.
1.2 Metodo di prova
1.2.1 Esperimento di alimentazione: l'esperimento di alimentazione deve essere condotto nell'allevamento della Hongji Company nella città di Jiande; 1024 galline ovaiole di razza Romana devono essere selezionate e divise casualmente in quattro gruppi da 256 esemplari ciascuno (ogni gruppo deve essere ripetuto quattro volte e ogni gallina deve essere ripetuta 64 volte); le galline devono essere alimentate con quattro diete con diversi contenuti di diluidina, con 0, 100, 150 e 200 mg/kg di mangime aggiunti a ciascun gruppo. Il test è iniziato il 10 aprile 1997; le galline potevano trovare cibo e acqua liberamente. Devono essere registrati il cibo consumato da ciascun gruppo, il tasso di deposizione, la produzione di uova, le uova rotte e il numero di uova anomale. Il test si è concluso il 30 giugno 1997.
1.2.2 Misurazione della qualità delle uova: durante l'esecuzione del test, che si svolge nell'arco di quattro giorni, devono essere prelevate casualmente 20 uova per misurare gli indicatori relativi alla qualità delle uova, come l'indice di forma, l'unità Haugh, il peso relativo del guscio, lo spessore del guscio, l'indice del tuorlo, il peso relativo del tuorlo, ecc. Inoltre, il contenuto di colesterolo nel tuorlo deve essere misurato utilizzando il metodo COD-PAP in presenza del reagente Cicheng prodotto dall'impianto di analisi biochimiche Ningbo Cixi.
1.2.3 Misurazione degli indici biochimici del siero: 16 galline da test devono essere prelevate da ciascun gruppo ogni volta che il test è stato implementato per 30 giorni e al termine del test per preparare il siero dopo aver prelevato il sangue dalla vena dell'ala. Il siero deve essere conservato a bassa temperatura (-20℃) per misurare i relativi indici biochimici. La percentuale di grasso addominale e il contenuto lipidico del fegato devono essere misurati dopo la macellazione e l'asportazione del grasso addominale e del fegato al termine del prelievo di sangue.
La superossido dismutasi (SOD) deve essere misurata utilizzando il metodo di saturazione in presenza del kit di reagenti prodotto dal Beijing Huaqing Biochem. & Tech. Research Institute. L'acido urico (UN) nel siero deve essere misurato utilizzando il metodo Uricase-PAP in presenza del kit di reagenti Cicheng; i trigliceridi (TG3) devono essere misurati utilizzando il metodo GPO-PAP a un solo passaggio in presenza del kit di reagenti Cicheng; la lipasi deve essere misurata utilizzando la nefelometria in presenza del kit di reagenti Cicheng; il colesterolo totale sierico (CHL) deve essere misurato utilizzando il metodo COD-PAP in presenza del kit di reagenti Cicheng; la transaminasi glutammico-piruvica (GPT) deve essere misurata utilizzando la colorimetria in presenza del kit di reagenti Cicheng; la transaminasi glutammico-ossalacetica (GOT) deve essere misurata utilizzando la colorimetria in presenza del kit di reagenti Cicheng; la fosfatasi alcalina (ALP) deve essere misurata utilizzando il metodo cinetico in presenza del kit di reagenti Cicheng; lo ione calcio (Ca2+) nel siero deve essere misurato utilizzando il metodo del complesso blu di metiltimolo in presenza del kit di reagenti Cicheng; il fosforo inorganico (P) deve essere misurato utilizzando il metodo del blu di molibdato in presenza del kit di reagenti Cicheng.
2 Risultato del test
2.1 Effetto sulla produzione di uova
Le prestazioni di deposizione delle uova dei diversi gruppi trattati con la diluidina sono riportate nella Tabella 2.
Tabella 2 Prestazioni delle galline alimentate con dieta di base integrata con quattro livelli di diluidina
| Quantità di diluidina da aggiungere (mg/kg) | ||||
| 0 | 100 | 150 | 200 | |
| Assunzione di mangime (g) |  | |||
| Tasso di deposizione delle uova (%) | ||||
| Peso medio dell'uovo (g) | ||||
| Rapporto tra materia e uovo | ||||
| Tasso di uova rotte (%) | ||||
| Tasso di uova anomale (%) | ||||
Dalla Tabella 2, i tassi di deposizione di tutti i gruppi trattati con diluidina sono migliorati in modo evidente, con un effetto ottimale quando si utilizza 150 mg/kg (fino all'83,36%), e un miglioramento dell'11,03% (p<0,01) rispetto al gruppo di riferimento; pertanto la diluidina ha l'effetto di migliorare il tasso di deposizione. Osservando il peso medio delle uova, si nota un aumento (p>0,05) del peso delle uova con l'aumentare della diluidina nella dieta giornaliera. Rispetto al gruppo di riferimento, la differenza tra tutte le parti trattate dei gruppi trattati con 200 mg/kg di diluidina non è evidente quando si aggiungono in media 1,79 g di mangime ingerito; Tuttavia, la differenza diventa gradualmente più evidente con l'aumento della diluidina, e la differenza del rapporto tra materiale e uova tra le parti lavorate è evidente (p<0,05), e l'effetto è ottimale quando 150 mg/kg di diluidina e 1,25:1 che è ridotto del 10,36% (p<0,01) rispetto al gruppo di riferimento. Osservando il tasso di uova rotte di tutte le parti lavorate, il tasso di uova rotte (p<0,05) può essere ridotto quando la diluidina viene aggiunta alla dieta giornaliera; e la percentuale di uova anomale si riduce (p<0,05) con l'aumento della diluidina.
2.2 Effetti sulla qualità delle uova
Come si evince dalla Tabella 3, l'indice di forma dell'uovo e il peso specifico dell'uovo non sono influenzati (p>0,05) dall'aggiunta di diluidina alla dieta giornaliera, mentre il peso del guscio aumenta con l'aumentare della quantità di diluidina aggiunta alla dieta giornaliera, con un incremento del 10,58% e del 10,85% (p<0,05) rispettivamente rispetto ai gruppi di riferimento quando vengono aggiunti 150 e 200 mg/kg di diluidina; lo spessore del guscio d'uovo aumenta con l'aumentare della quantità di diluidina nella dieta giornaliera, con un incremento del 13,89% (p<0,05) quando vengono aggiunti 100 mg/kg di diluidina rispetto ai gruppi di riferimento, e un incremento del 19,44% (p<0,01) e del 27,7% (p<0,01) rispettivamente quando vengono aggiunti 150 e 200 mg/kg. L'unità Haugh (p<0,01) migliora in modo evidente con l'aggiunta di diludina, il che indica che la diludina ha l'effetto di promuovere la sintesi dell'albume denso dell'uovo. La diludina ha la funzione di migliorare l'indice del tuorlo, ma la differenza non è evidente (p<0,05). Il contenuto di colesterolo del tuorlo d'uovo di tutti i gruppi è diverso e può essere ridotto in modo evidente (p<0,05) dopo l'aggiunta di 150 e 200 mg/kg di diludina. I pesi relativi del tuorlo d'uovo sono diversi tra loro a causa delle diverse quantità di diludina aggiunte, in cui i pesi relativi del tuorlo d'uovo sono migliorati del 18,01% e del 14,92% (p<0,05) quando 150 mg/kg e 200 mg/kg rispetto al gruppo di riferimento; pertanto, la diludina appropriata ha l'effetto di promuovere la sintesi del tuorlo d'uovo.
Tabella 3 Effetti della diluidina sulla qualità delle uova
| Quantità di diluidina da aggiungere (mg/kg) | ||||
| Qualità delle uova | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Indice di forma dell'uovo (%) |  | |||
| Peso specifico dell'uovo (g/cm³) | ||||
| Peso relativo del guscio d'uovo (%) | ||||
| Spessore del guscio d'uovo (mm) | ||||
| Unità Haugh (U) | ||||
| Indice del tuorlo d'uovo (%) | ||||
| Colesterolo del tuorlo d'uovo (%) | ||||
| Peso relativo del tuorlo d'uovo (%) | ||||
2.3 Effetti sulla percentuale di grasso addominale e sul contenuto di grasso epatico delle galline ovaiole
Si vedano la Figura 1 e la Figura 2 per gli effetti della diluidina sulla percentuale di grasso addominale e sul contenuto di grasso epatico delle galline ovaiole.
Figura 1 Effetto della diluidina sulla percentuale di grasso addominale (PAF) delle galline ovaiole
| Percentuale di grasso addominale | |
| Quantità di diluidina da aggiungere |
Figura 2 Effetto della diluidina sul contenuto di grasso epatico (LF) delle galline ovaiole
| Contenuto di grasso nel fegato | |
| Quantità di diluidina da aggiungere |
Come si evince dalla Figura 1, le percentuali di grasso addominale del gruppo di test si riducono rispettivamente dell'8,3% e del 12,11% (p<0,05) con 100 e 150 mg/kg di diludine rispetto al gruppo di riferimento, e la percentuale di grasso addominale si riduce del 33,49% (p<0,01) con l'aggiunta di 200 mg/kg di diludine. Come si evince dalla Figura 2, il contenuto di grasso epatico (assolutamente secco) trattato rispettivamente con 100, 150 e 200 mg/kg di diludine si riduce rispettivamente del 15,00% (p<0,05), del 15,62% (p<0,05) e del 27,7% (p<0,01) rispetto al gruppo di riferimento; Pertanto, la diluidina ha l'effetto di ridurre la percentuale di grasso addominale e il contenuto di grasso epatico del contenuto di grasso nelle galline ovaiole, e l'effetto è ottimale quando vengono aggiunti 200 mg/kg di diluidina.
2.4 Effetto sugli indici biochimici sierici
Come si evince dalla Tabella 4, la differenza tra le parti elaborate durante la Fase I (30 giorni) del test SOD non è evidente e gli indici biochimici sierici di tutti i gruppi a cui è stata aggiunta la diluidina nella Fase II (80 giorni) del test sono superiori al gruppo di riferimento (p < 0,05). L'acido urico (p < 0,05) nel siero può essere ridotto quando vengono aggiunti 150 mg/kg e 200 mg/kg di diluidina; mentre l'effetto (p < 0,05) è disponibile quando vengono aggiunti 100 mg/kg di diluidina nella Fase I. La diluidina può ridurre i trigliceridi nel siero, dove l'effetto è ottimale (p < 0,01) nel gruppo a cui sono stati aggiunti 150 mg/kg di diluidina nella Fase I ed è ottimale nel gruppo a cui sono stati aggiunti 200 mg/kg di diluidina nella Fase II. Il colesterolo totale nel siero si riduce con l'aumentare della quantità di diluidina aggiunta alla dieta giornaliera; più specificamente, i livelli di colesterolo totale nel siero si riducono rispettivamente del 36,36% (p<0,01) e del 40,74% (p<0,01) quando vengono aggiunti 150 mg/kg e 200 mg/kg di diluidina nella Fase I rispetto al gruppo di riferimento, e si riducono rispettivamente del 26,60% (p<0,01), del 37,40% (p<0,01) e del 46,66% (p<0,01) quando vengono aggiunti 100 mg/kg, 150 mg/kg e 200 mg/kg di diluidina nella Fase II rispetto al gruppo di riferimento. Inoltre, l'ALP aumenta con l'aumentare della diluidina aggiunta alla dieta giornaliera, mentre i valori di ALP nel gruppo a cui sono stati aggiunti 150 mg/kg e 200 mg/kg di diluidina sono significativamente più alti rispetto al gruppo di riferimento (p<0,05).
Tabella 4 Effetti della diluidina sui parametri sierici
| Quantità di diluidina da aggiungere (mg/kg) nella Fase I (30 giorni) del test | ||||
| Articolo | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superossido dismutasi (mg/mL) |  | |||
| Acido urico | ||||
| Trigliceridi (mmol/L) | ||||
| Lipasi (U/L) | ||||
| Colesterolo (mg/dL) | ||||
| Transaminasi glutammico-piruvica (U/L) | ||||
| Transaminasi glutammico-ossalacetica (U/L) | ||||
| Fosfatasi alcalina (mmol/L) | ||||
| Ione calcio (mmol/L) | ||||
| Fosforo inorganico (mg/dL) | ||||
| Quantità di diluidina da aggiungere (mg/kg) nella Fase II (80 giorni) del test | ||||
| Articolo | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superossido dismutasi (mg/mL) |  | |||
| Acido urico | ||||
| Trigliceridi (mmol/L) | ||||
| Lipasi (U/L) | ||||
| Colesterolo (mg/dL) | ||||
| Transaminasi glutammico-piruvica (U/L) | ||||
| Transaminasi glutammico-ossalacetica (U/L) | ||||
| Fosfatasi alcalina (mmol/L) | ||||
| Ione calcio (mmol/L) | ||||
| Fosforo inorganico (mg/dL) | ||||
3 Analisi e discussione
3.1 La diluidina nel test ha migliorato il tasso di deposizione, il peso dell'uovo, l'unità Haugh e il peso relativo del tuorlo d'uovo, il che ha indicato che la diluidina ha avuto l'effetto di promuovere l'assimilazione delle proteine e migliorare la quantità di sintesi dell'albume denso dell'uovo e delle proteine del tuorlo d'uovo. Inoltre, il contenuto di acido urico nel siero è stato ridotto in modo evidente; ed è stato generalmente riconosciuto che la riduzione del contenuto di azoto non proteico nel siero significa che la velocità del catabolismo delle proteine è stata ridotta e il tempo di ritenzione dell'azoto è stato posticipato. Questo risultato ha fornito la base per aumentare la ritenzione proteica, promuovere la deposizione delle uova e migliorare il peso dell'uovo delle galline ovaiole. Il risultato del test ha indicato che l'effetto di deposizione è ottimale quando sono stati aggiunti 150 mg/kg di diluidina, il che era sostanzialmente coerente con il risultato[6,7]di Bao Erqing e Qin Shangzhi e acquisito aggiungendo diludine nel periodo tardivo delle galline ovaiole. L'effetto si è ridotto quando la quantità di diludine ha superato i 150 mg/kg, il che potrebbe essere dovuto alla trasformazione delle proteine[8]è stato colpito a causa del dosaggio eccessivo e dell'eccessivo carico metabolico dell'organo sulla diluidina.
3.2 La concentrazione di Ca2+nel siero dell'uovo da deposizione era ridotto, il P nel siero era ridotto all'inizio e l'attività ALP era aumentata in modo evidente in presenza di diluidina, il che indicava che la diluidina influenzava in modo evidente il metabolismo di Ca e P. Yue Wenbin ha riferito che la diluidina poteva promuovere l'assorbimento[9] di elementi minerali Fe e Zn; l'ALP era presente principalmente nei tessuti, come fegato, ossa, tratto intestinale, reni, ecc.; l'ALP nel siero proveniva principalmente da fegato e ossa; l'ALP nelle ossa era presente principalmente negli osteoblasti e poteva combinare lo ione fosfato con il Ca2 dal siero dopo la trasformazione promuovendo la decomposizione del fosfato e aumentando la concentrazione dello ione fosfato, e veniva depositato sulle ossa sotto forma di idrossiapatite, ecc. al fine di portare alla riduzione di Ca e P nel siero, il che è coerente con l'aumento dello spessore del guscio d'uovo e del peso relativo del guscio d'uovo negli indicatori di qualità dell'uovo. Inoltre, il tasso di uova rotte e la percentuale di uova anomale si sono ridotti in modo evidente in termini di prestazioni di deposizione, il che spiega anche questo punto.
3.3 L'accumulo di grasso addominale e il contenuto di grasso epatico delle galline ovaiole sono stati ridotti in modo evidente con l'aggiunta di diludina alla dieta, il che indica che la diludina ha avuto l'effetto di inibire la sintesi di grasso nel corpo. Inoltre, la diludina potrebbe migliorare l'attività della lipasi nel siero nella fase iniziale; l'attività della lipasi è aumentata in modo evidente nel gruppo a cui sono stati aggiunti 100 mg/kg di diludina e i contenuti di trigliceridi e colesterolo nel siero sono stati ridotti (p < 0,01), il che indica che la diludina potrebbe promuovere la decomposizione dei trigliceridi e inibire la sintesi del colesterolo. L'accumulo di grasso potrebbe essere inibito perché l'enzima del metabolismo lipidico nel fegato[10,11]e la riduzione del colesterolo nel tuorlo d'uovo ha anche spiegato questo punto [13]. Chen Jufang ha riferito che la diluidina potrebbe inibire la formazione di grasso nell'animale e migliorare la percentuale di carne magra dei polli da carne e dei suini, e ha avuto l'effetto di trattare il fegato grasso. Il risultato del test ha chiarito questo meccanismo d'azione, e i risultati della dissezione e dell'osservazione delle galline del test hanno anche dimostrato che la diluidina potrebbe ridurre in modo evidente il tasso di incidenza del fegato grasso nelle galline ovaiole.
3.4 GPT e GOT sono due importanti indicatori che riflettono le funzioni del fegato e del cuore, e il fegato e il cuore possono essere danneggiati se le loro attività sono troppo elevate. Le attività di GPT e GOT nel siero non sono cambiate in modo evidente quando è stata aggiunta la diluidina al test, il che indica che il fegato e il cuore non sono stati danneggiati; inoltre, il risultato della misurazione di SOD ha mostrato che l'attività di SOD nel siero potrebbe essere migliorata in modo evidente quando la diluidina è stata utilizzata per un certo periodo di tempo. SOD si riferisce al principale spazzino del radicale libero superossido nel corpo; è significativo per il mantenimento dell'integrità della membrana biologica, il miglioramento della capacità immunitaria dell'organismo e il mantenimento della salute dell'animale quando il contenuto di SOD nel corpo è aumentato. Quh Hai, et al. hanno riportato che la diluidina potrebbe migliorare l'attività della 6-glucosio fosfato deidrogenasi nella membrana biologica e stabilizzare i tessuti [2] della cellula biologica. Sniedze ha sottolineato che la diluidina ha inibito l'attività [4] della NADPH citocromo C reduttasi dopo aver studiato la relazione tra la diluidina e l'enzima rilevante nella catena di trasferimento elettronico specifica del NADPH nei microsomi del fegato di ratto. Odydents ha anche sottolineato che la diluidina era correlata [4] al sistema composito dell'ossidasi e all'enzima microsomiale correlato al NADPH; e il meccanismo d'azione della diluidina dopo essere entrata nell'animale è quello di svolgere un ruolo di resistenza all'ossidazione e di protezione della membrana biologica [8] intercettando l'attività dell'enzima di trasferimento elettronico NADPH del microsoma e inibendo il processo di perossidazione del composto lipidico. Il risultato del test ha dimostrato che la funzione protettiva della diluidina sulla membrana biologica dai cambiamenti dell'attività SOD ai cambiamenti delle attività di GPT e GOT e ha confermato i risultati dello studio di Sniedze e Odydents.
Riferimento
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Data di pubblicazione: 7 giugno 2021
